新型コロナウイルスSARS-CoV-2(2019-nCoV)

新型コロナウイルスSARS-CoV-2によるCOVID-19の発生は、世界中で感染者数が300万人を超える世界的なパンデミックに変わりました。急速な感染率と高い死亡率により、COVID-19は世界中の何百万人もの人々に感染する可能性があると推定されております。この段階でのさらなる広がりを抑えるための迅速な対応が重要であり、ライフサイエンス研究の促進が必須となります。現在世界中の科学者はCOVID-19における分子生物学・メカニズムおよび中心となる作用様式の理解に焦点を当て、ウイルスを完全に理解し安全な治療介入を開発するためにSARS-CoV-2に関連する高品質の組換えタンパク質などの信頼できる研究用試薬を必要としております。当社の取り扱うサプライヤーにおきましても、迅速な研究開発をサポートするためタンパク質や抗体、検出キットなど多岐に渡る製品の開発を行い、数多くの製品を提供しております。

コロナウイルスの構造

コロナウイルスはプラス鎖一本鎖RNAウイルスであり、これまでにヒトへの感染が確認されているコロナウイルスは7種類存在しております。すべてのコロナウイルスは非常によく似た構造を有しており、ウイルスゲノムはスパイク(S)タンパク質、ヌクレオカプシド(N)タンパク質、ヘマグルチニンエステラーゼ(HE)タンパク質、パパイン様プロテアーゼ、M(膜)タンパク質など独自の機能を持ついくつかのタンパク質をコードしております。主に薬学的に重要な2つの抗原はSタンパク質とNタンパク質です。Nタンパク質は基本的に保存されており、診断マーカーとして使用されます。一方、Sタンパク質は受容体結合と膜融合の仲介をします。Sタンパク質にはS1とS2の2つのサブユニットが含まれており、S1には受容体結合ドメイン(RBD)が含まれており、宿主細胞表面受容体の認識と結合に関与しております。S2サブユニットは構造の幹であり、膜融合に必要な他の基本要素が含まれております。Sタンパク質はワクチンと中和抗体の標的タンパク質となります。

コロナウイルスの感染において宿主細胞受容体との相互作用が重要なステップであり、SARS-CoV-2ウイルスはヒトアンジオテンシン変換酵素2(ACE2)受容体との相互作用を介してヒト呼吸上皮細胞に感染する可能性があることが報告されており※、実際に組換えSタンパク質と組換えACE2タンパク質の結合が確認されております。

※参考文献
Xintian Xu. Evolution of the novel coronavirus from the ongoing Wuhan outbreak and modeling of its spike protein for risk of human transmission. SCIENCE CHINA Life Sciences. 2020

ACRO Biosystems 社ACRO Biosystems 社

リコンビナントタンパク質を提供

ACROBiosystems社ではHEK293のヒト細胞発現プラットフォームに基づいて、高品質のSARS-CoV-2全長Sタンパク質やS1タンパク質およびヒトACE2タンパク質など多数のタンパク質を開発しております。ヒトACE2タンパク質とS、S1タンパク質の結合活性は、それぞれBiacoreおよびForteBio Octetプラットフォームに基づいたSPRおよびBLIテクノロジーにより検証されております。 高品質のタンパク質に加えてACROBiosystems社ではSPR/BLI/ELISAのプロトコルを提供しております。

SARS-CoV-2(COVID-19)製品のパンフレットはこちら

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COVID-19関連トピックス

SARS-CoV-2 S RBD : ACE2 [Biotinylated] 阻害剤スクリーニングキット

ACROBiosystems社では阻害剤候補を迅速に同定および特性評価するためのSARS-CoV-2阻害スクリーニングキットを開発しました。このアッセイは固定化されたSARS-CoV-2 Sタンパク質RBDとビオチン化ヒトACE2タンパク質間の結合を測定する比色ELISAプラットフォームを使用しております。他の製品と比較して、ビオチン化ACE2タンパク質は汎用性が優れており、検出シグナルに影響を与えることなく、さまざまな抗体や低分子化合物阻害剤のスクリーニングに適しております。
※本製品は研究用です。臨床診断や治療を目的とした用途には使用できませんので予めご了承ください。

製品の特徴

  • 96テスト分あるいは480テスト分の試薬が含まれており、ハイスループットでのスクリーニングが可能
  • ビオチン化ACE2タンパク質を採用することで短時間での測定および簡単な操作を実現
  • ポジティブコントロール付属
  • HEK293細胞発現タンパク質を使用
  • 厳格なQC基準を設けており、バッチ間の高い再現性を保証

測定原理

    測定には以下の4つの簡単なステップが含まれます。

  1. SARS-CoV-2 Sタンパク質RBDでプレートをコーティングします
  2. 50uLのビオチン化ヒトACE2タンパク質をコーティングしたプレートに加えます
  3. ポジティブコントロールあるいは用意した候補化合物を加えます
  4. ストレプトアビジン-HRPを追加し、続いてTMBまたはその他の比色HRP基質を追加します
  5. 最後に異なる実験グループ間のOD値を比較することで候補物質のSタンパク質RBD : ACE2間の結合阻害能を判断します。

構成品

バイアルID構成品名96T480T
A010-214SARS-CoV-2 S protein RBD10ug60ug
A011-214Biotinylated Human ACE210ug10ug
A003-214Streptavidin-HRP10ug10ug
AC2-NA005SARS-CoV-2 Inhibitor20ug50ug

測定データ例

1. Inhibition of Human ACE2 [Biotinylated] :SARS-CoV-2 S protein RBD Binding by SARS-CoV-2 inhibitor

Serial dilutions of SARS-CoV-2 inhibitor (1:2 serial dilutions, from 20 μg/mL to 0.039 μg/mL (180 nM to 0.35 nM)) was added into Biotinylated ACE2:SARS-CoV-2 S protein RBD binding reactions. The assay was performed according to the above described protocol. Background was subtracted from data points prior to log transformation and curve fitting.

2. Inhibitor screening kit to detect the mAb in different concentrations of human serum

The inhibitor screening kit can be used for studies of mAbs in serum. Measured the different concentration of human serum by SARS-CoV-2 inhibitor screening kit (Cat. No. EP-105), and CV is lower than 30%. The result showed that the matrix had no influence in kit.

ACROBiosystems社では高純度および高活性のSARS-CoV-2 S, S1, S RBD, Nucleocapsid, ヒトACE2タンパク質なども提供しております。タンパク質の純度と結合活性はSEC-HPLC、SPR、ELISAおよびBLIにより測定され、プロトコルは無料で提供しております。

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Elabscience 社Elabscience 社

抗新型コロナウイルス抗体IgG / IgM検出キットを提供

Elabscience社ではヒト全血、血清または血漿中のSARS-CoV-2(2019-nCoV)に特異的なIgGおよびIgMの検出キットを提供しております。
このキットは金コロイドイムノクロマトグラフ法(GICA)を採用しており、10分の短時間でIgGおよびIgM抗体を定性的に検出するための
ラテラルフローデバイスです。
※本製品は研究用として販売しております。臨床診断を目的とした検査には使用できませんので予めご了承ください。
※Elabscience社の子会社であるUNscience社のラベルで販売をしております。

製品名製品番号容量価格詳細情報
COVID-19 IgG/IgM Rapid TestUNCOV-401Kit
(40Test)
¥50,000お問合せ
構成品:テストカセット(40テスト分)、バッファー(5mL, 1本)、ドロッパー(40本)、乾燥剤

アッセイフロー

結果判定

抗体

製品名製品番号ターゲットアプリケーション容量価格詳細情報
SARS-COV-2 Spike Monoclonal Antibody(2019-nCoV)E-AB-V1001SARS-CoV-2 SpikeELISA50uL/100uL/200uLお問合せ
SARS-COV-2 Spike Monoclonal Antibody(2019-nCoV)E-AB-V1002SARS-CoV-2 SpikeELISA50uL/100uLお問合せ
SARS-COV-2 Spike Monoclonal Antibody(2019-nCoV)E-AB-V1003SARS-CoV-2 SpikeIF,ELISA50uL/100uLお問合せ
SARS-COV-2 Spike S1 Monoclonal Antibody(2019-nCoV)E-AB-V1005SARS-CoV-2 SpikeIF,ELISA50uL/100uLお問合せ
SARS-COV-2 Spike RBD Polyoclonal Antibody(2019-nCoV)E-AB-V1006SARS-CoV-2 SpikeWB,ELISA50uL/100uLお問合せ
SARS-COV-2 NP Monoclonal Antibody(2019-nCoV)E-AB-V1011SARS-CoV-2-NPELISA50uL/100uL/200uLお問合せ
SARS-COV-2 NP ScFv Monoclonal Antibody(2019-nCoV)E-AB-V1012SARS-CoV-2-NPELISA50uL/100uL/200uLお問合せ
SARS-COV-2 NP Monoclonal Antibody(2019-nCoV)E-AB-V1013SARS-CoV-2-NPWB,ELISA50uL/100uLお問合せ
SARS-COV-2 NP Monoclonal Antibody(2019-nCoV)E-AB-V1014SARS-CoV-2-NPWB,ELISA50uL/100uLお問合せ
ACE2 Polyclonal AntibodyE-AB-12224ACE2IHC,ELISA20uL/60uL/120uL/200uLお問合せ
ACE2 Polyclonal AntibodyE-AB-70126ACE2WB,ELISA60uL/120uL/200uLお問合せ

EUROIMMUN 社EUROIMMUN社

新型コロナウイルス検出の為の完全なテストパッケージを提供

EUROIMMUN社はドイツ リューベックにおける医療検査診断用の試薬および自動システムを提供するメーカーであり、2002/2003年のSARS-CoV、2012/2013年のMERS-CoVおよび2015/2016年のジカウイルスによる感染発生に対する診断テストシステムを提供した最初の企業です。

この度EUROIMMUN社ではSARS-CoV-2に対する抗体を検出するELISAアッセイおよび直接検出の為のPCRテストを開発いたしました。Anti-SARS-CoV-2 ELISA (IgG)およびAnti-SARS-CoV-2 ELISA (IgA)はCEマークを取得した診断テストであり、同社はCOVID-19診断をサポートする診断テストを提供する最初のヨーロッパメーカーの一つとなりました。各テストシステムは現在日本市場におきましては研究用途のみに提供されております

同社ではSARS-CoV-2の発生が知られるようになってすぐに開発を開始し、わずか数週間後にIgAおよびIgGの抗SARS-CoV-2抗体を検出するための2種類のELISAキットを発売いたしました。これらの製品は現在では、ウイルスを直接検出するEURORealTime SARS-CoV-2により補完されております。

抗SARS-CoV-2抗体検出ELISAキット

製品の特徴

  • 世界で初めて(2020年2月時点)商品化された抗新型コロナウイルス抗体検出用(IgA及びIgG)ELISAキット
  • キット内に含まれるキャリブレーターのO.D.値との比較により陽性、ボーダーライン、陰性の分類が可能(半定量)
  • 最も特異性が高いと考えられるS1領域をターゲット
  • EU加盟国の基準を満たすCEマーク取得済
  • 8連チューブ×12=96ウェル分の構成で測定サンプル数に応じて使用可能
製品名製品番号抗原Igクラス容量価格詳細情報
Anti-SARS-CoV-2 ELISA (IgG)EI2606-9601GSARS-CoV-2
(S1 domain of the spike protein)
IgG1Kit
(96well)
お問合せお問合せ
Anti-SARS-CoV-2 ELISA (IgA)EI2606-9601ASARS-CoV-2
(S1 domain of the spike protein)
IgA1Kit
(96well)
お問合せお問合せ

リアルタイムRT-PCR検出

EURORealTime SARS-CoV-2は、新型コロナウイルスを特異的に検出するために開発されました。ウイルスの2つの異なる遺伝子配列を同時に検出するため非常に高感度に検出が可能となっております。

製品の特徴

  • リアルタイムPCRシステムを用いた1ステップRT-PCR法による高感度の新型コロナウイルス検出定量
  • 反応前に2種類の試薬を混合するだけの簡単な試薬調整で、試薬調整時間を短縮し試薬調整のミスを防止
  • 2か所のターゲット領域を増幅する事で高感度を実現し、かつ1つのウイルスRNA領域に変異があった場合にももう1つのターゲット領域で検出・定量が可能
  • サンプル抽出時にキット付属のInternal Controlを直接加えてRNA精製を行い、リアルタイムPCRでターゲットとコントロールの2色検出を行うことでFalse negative(偽陰性)を防止(Internal ControlはRT-PCR反応試薬の調整時に添加することも可能)
  • 主要3社のリアルタイムPCRシステムでバリデーション済で全ての機種で同一プロトコルでの1ステップRT-PCRの実験系

対応機種

  • ライトサイクラー480システム II (Roche)
  • 7500 FastリアルタイムPCRシステム (Applied Biosystems)
  • CFX96 TouchリアルタイムPCR解析システム(Bio-Rad)
製品名製品番号検出システム容量価格詳細情報
EURORealTime SARS-CoV-2MP2606-0200One-step リアルタイムPCR200 reactionお問合せお問合せ

製品関連情報

EUROIMMUN社 SARS-CoV-2トータルソリューションに関するウェブサイトはこちら(英語)
ドイツ研究機関から公開された本ELISAキットの有用性を示す論文はこちら
SARS-CoV-2(COVID-19)製品のパンフレットはこちら
SARS-CoV-2 (COVID-19)に関するFAQはこちら(英語)

SignalChem 社SignalChem 社

AI技術を駆使した医薬品開発の為のリコンビナントタンパク質を提供

SignalChem社はカナダ リッチモンドに本社を置く細胞シグナル伝達とタンパク質工学のグローバルリーダーです。同社ではSARS-CoV-2 ウイルスの発生以来、関連する新しい研究ツールの作成と開発に投資をしてきました。これまでに培った活性タンパク質を作製する高度なバイオエンジニアリング技術とAI技術による医薬品開発力を駆使し、SARS-CoV-2 S1 タンパク質、RBDフラグメント、Nタンパク質などのタンパク質を大量生産するための発現システムをすでに確立させております。これらのタンパク質は研究段階におけるキットのスタンダードタンパク質や中和抗体開発のターゲットタンパク質として使用できます。

タンパク質

製品名製品番号タグ発現ホスト配列容量価格詳細情報
2019-nCoV PLpro, ActiveC19PL-G241HHisE.coli1564-18825ug¥36,000
10ug¥50,000
20ug¥71,000
50ug¥99,000
2019-nCoV Spike protein RBDC19SD-G241HHisCHO cells319-54110ug¥22,000
20ug¥42,000
50ug¥64,000
100ug¥96,000
2019-nCoV Spike protein RBDC19SD-G241FFcCHO cells319-54110ug¥22,000
20ug¥42,000
50ug¥64,000
100ug¥96,000
2019-nCoV Spike protein S1C19S1-G241FFcCHO cells16-68510ug¥42,000
20ug¥64,000
50ug¥96,000
100ug¥145,000
2019-nCoV Spike protein S1C19S1-G241HHisCHO cells16-68510ug¥42,000
20ug¥64,000
50ug¥96,000
100ug¥145,000
ACE2 (18-615) ProteinA51C2-G342FFcCHO cells18-61510ug¥42,000
20ug¥64,000
50ug¥96,000
100ug¥145,000
ACE2 (19-740) ProteinA51C2-G341FFcCHO cells19-74010ug¥42,000
20ug¥64,000
50ug¥96,000
100ug¥145,000

抗体

製品名製品番号ターゲットアイソタイプ容量価格詳細情報
Anti-2019nCoV Spike ProteinC19S1-61H2019nCoV spike protein
SARS-CoV spike protein
Human, IgG120ug¥37,000
100ug¥72,000

Sino Biological 社Sino Biological社

リコンビナントタンパク質、抗体、ELISAキット、cDNA、ライセートを提供

Sino Biological社はワクチン開発や中和抗体開発を支援するため、Nタンパク質、Sタンパク質、S1およびS2サブユニット、RBDドメインを含む組み換え抗原や抗体、抗原検出キット、発現プラスミドなどSARS-CoV-2に関する一連の研究用試薬を提供しております。
Sino Biological社は世界に先駆けてSARS-CoV-2に関する製品を提供しているため、世界中の多くの研究機関におきまして使用されております。

Sino Biological社ではウェスタンブロットやフローサイトメトリー、免疫組織染色など様々なアプリケーションに対応した製品を提供しております。また、従来のマウスモノクローナル抗体やウサギポリクローナル抗体に加え、新たにウサギモノクローナル抗体の提供も充実させております。

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新型コロナウイルスSARS-CoV-2に対する中和抗体を開発

Sino Biological社ではSARS-CoV-2に特異的な中和活性を示すモノクローナル抗体を開発しました。

製品番号40591-MM4340592-MM5740592-R001
ターゲットAnti-Spike S1Anti-Spike RBDAnti-Spike RBD
タイプMouse MAbMouse MAbRabbit MAb
アイソタイプMouse IgG1Mouse IgG2b-
アプリケーションNeutralization, ELISANeutralization, ELISA-

中和活性測定

SARS-CoV-2 Spike PSVに感染した293T-ACE2細胞を対象に、マイクロ中和アッセイを実施した結果、これらの中和抗体はACE2過剰発現293T細胞上のSARS-CoV-2 Spike PSVの感染を効果的に抑制しました。

S1 Neutralizing Antibody, Mouse MAb

Conc. (µg/mL)Inhibition%
10096.39%
1094.57%
142.24%
0.1-5.53%
The IC50 is typically 1.41 µg/mL.

RBD Neutralizing Antibody, Mouse MAb

Conc. (µg/mL)Inhibition%
10095.51%
1093.32%
175.69%
0.110.11%
The IC50 is typically 0.41 µg/mL.

RBD Neutralizing Antibody, Rabbit MAb

Conc. (µg/mL)Inhibition%
10099.56%
1099.9%
159.29%
0.15.59%
The IC50 is typically 0.11 µg/mL.

競合ELISA測定

これらの抗体の中和能は競合ELISA原理を利用したSARS-CoV-2阻害剤スクリーニングELISAキット(製品番号 KIT001)を用いて測定されています。

S1 Neutralizing Antibody, Mouse MAb

The IC50 is typically 0.857 nM

RBD Neutralizing Antibody, Mouse MAb

The IC50 is typically 3.694 nM

RBD Neutralizing Antibody, Rabbit MAb

The IC50 is typically 0.066 nM

特異性測定

SARS-CoV-2は、2003年のSARS-CoVと80%の配列同一性を有しているため、SARS-CoV-2抗原に対する抗体はSARS-CoVに交差反応性を示すことが多くのケースで確認されています。本抗体につきましては7つのコロナウイルスすべてに対し試験を行い、SARS-CoV-2 Spikeに特異的であることが示されました。

S1 Neutralizing Antibody

RBD Neutralizing Antibody

Chondrex 社Chondrex 社

間接ELISA法を用いた抗体測定キットの開発のためのブロッキングバッファーを提供

Chondrex社では抗体測定における、血清・血漿の成分により引き起こされる高い非特異的反応を強力に抑制することが可能なブロッキング剤 ChonBlock™ を提供しております。
ChonBlock™ はヒト免疫グロブリンが固相担体表面に吸着することによって起こる偽陽性反応に対して、4%BSAに比べ40倍、100%ヤギ血清に比べて10倍以上のブロッキング効果を有しています。

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製品名製品番号容量価格詳細情報
ChonBlock™ Blocking/Sample Dilution Buffer9068100mL¥10,000
ChonBlock™ Detection Antibody Dilution Buffer90681100mL¥10,000

ChonBlock™ ELISA Bufferのプロトコルはこちら

無償サンプル配布中

ELISA用 ChonBlock の無償サンプルを配布しております。
サンプルをご希望の方は弊社企画開発課までお問い合わせ下さい。

※本製品を初めて使用される方を対象とさせて頂きます。
※無償サンプルは Blocking/Sample Dilution Buffer、Detection Antibody Dilution Buffer 各10mlでのご提供となります。
※お1人様1回までのご提供とさせて頂きます。

無償サンプル配布中


サイトカインストームモニタリングのためのELISAキット

新型コロナウイルス感染症(COVID-19)感染者の内、軽度の患者よりも重度の患者の多くにサイトカインストームが見られ、
サイトカイン放出症候群により致死的な急性呼吸器不全症候群(ARDS)が引き起こされる可能性が示されております。
※Mehta P, McAuley DF, Brown M, Sanchez E, Tattersall RS, Manson JJ(2020) COVID-19: consider cytokine storm syndromes and immunosup‑pression. Lancet: https://doi.org/10.1016/S0140-6736(20)30628-0

製品名測定範囲製品番号価格, 容量詳細情報
Human IFN gamma Detection Kit
法令:労 危
16~1,000 pg/ml6804¥49,000
1キット
(96 well)
データシート
Human IL-1 beta Detection Kit
法令:労 危
4~250 pg/ml6805データシート
Human IL-2 Detection Kit
法令:労 危
16~1,000 pg/ml6811データシート
Human IL-4 Detection Kit
法令:労 危
32~2,000 pg/ml6803データシート
Human IL-6 Detection Kit
法令:労 危
9~600 pg/ml6802データシート
Human IL-10 Detection Kit
法令:労 危
8~500 pg/ml6806データシート
Human IL-17 Detection Kit
法令:労 危
16~1,000 pg/ml6808データシート
Human TNF alpha Detection Kit
法令:労 危
16~1,000 pg/ml6801データシート
Human CCL2 Detection Kit
法令:労 危
16~1,000 pg/ml6821データシート
Human CCL5 Detection Kit
法令:労 危
16~1,000 pg/ml6822データシート

Chondrex社サイトカイン・ケモカインELISAキット全製品リストはこちら

HMGB1測定キット

サイトカインストームの原因因子の1つとして炎症誘発性タンパク質のHMGB1が知られております。Anderssonらによる最近の報告ではCOVID-19の重症例において、肺での内因性タンパク質HMGB1の大量放出が肺の炎症と組織の損傷に関係している可能性があるとされております。Chondrex社では血清中の抗HMGB1抗体に影響を受けないHMGB1測定キットを提供しております。本キットは血清および細胞培養培地中のHMGB1を測定します。
※Andersson U, Wang H, Palmblad K, Aveberger AC, Bloom O, Erlandsson-Harris H, et al. High mobility group 1 protein (HMG-1) stimulates proinflammatory cytokine synthesis in human monocytes. J Exp Med. 2000;192(4):565–570. doi: 10.1084/jem.192.4.565.
※Andersson, U., Ottestad, W. & Tracey, K.J. Extracellular HMGB1: a therapeutic target in severe pulmonary inflammation including COVID-19?. Mol Med 26, 42 (2020). https://doi.org/10.1186/s10020-020-00172-4

製品名測定範囲製品番号容量価格詳細情報
HMGB1 Detection Kit0.8-50 ng/ml60101 Kit¥114,000データシート

Cayman Chemical 社Cayman Chemical 社

新型コロナウイルスに対するドラッグリポジショニンング研究をサポート

Cayman Chemical社では感染症やその他の健康上の問題の治療と予防の研究に使用可能な多様なウイルス剤を提供しております。この重要な研究ツールは、有害なウイルスの成長サイクルと免疫システムが感染を排除するためにどのように反応するかなど、主要なシグナル経路をより理解するために有用です。

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画像提供:CDC/Alissa Eckert, Dan Higgins

Cloud-Clone 社Cloud-Clone 社

SARS-CoV-2関連研究における感染メカニズムの解明や創薬研究をサポート

Cloud-Clone社ではこれまでの報告で得られているウイルス感染のターゲットタンパク質およびサイトカインストームに関するELISAキットやリコンビナントタンパク質、抗体製品を提供しております。

詳しくはこちら

ウイルス不活化 純粋二酸化塩素発生剤 クローリンO2錠

ウイルス滅菌には1ppm濃度でインフルエンザ/コロナウイルス不活化!

二酸化塩素は、強力な酸化剤であり、殺菌剤です。オゾンと同様、二酸化塩素は圧縮保存が出来ないといわれていましたが、最先端の技術により錠剤にすることで可能になりました。[クローリンO2錠]は錠剤二酸化塩素発生剤です。安心・安全な滅菌、消臭剤として幅広く使用できます。

主な用途

  • 実験用具・機器の殺菌に
  • 衛生関連の機材の除菌・消毒に
  • 小規模の除菌水精製に
  • ラボ・食品工場等の衛生管理に
  • 動物飼育室内の消毒・殺菌・消臭に

※弊社では大学、公官庁、企業等の研究機関以外の方への販売は行っておりません。
個人、病院など研究機関以外のお客様は(有)テクニコンインターナショナル(TEL:03-5834-1788)へお問合せください。

詳しくはこちら

資料請求・製品に関するお問合せは弊社企画開発課まで

企画開発課 [TEL] 03-3241-2573 [FAX] 03-3279-6397

本ページに掲載の商品は全て研究用試薬です。研究目的以外の用途にはご使用できません。また、個人の方への販売は行っておりません。